文章首次發表于
《中國醫學裝備》雜志
文中實驗所用內毒素檢測試劑盒、鱟試驗微生物快速檢測系統(ELx808IULAXH)及無熱原耗材均為（廈門鱟試劑生物科技股份有限公司）產品
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王蘇湘 滕朝宇 吳瑕 王宇 (排名不分先后)
[文章編號]1672-8270（2019）07-0059-06[中圖分類號]R197.39[文獻標識碼]A
關鍵詞：
血液透析；內毒素檢測試劑盒；廈門鱟試劑；廈門鱟試劑凝膠法鱟試劑；廈門鱟試劑動態濁度法鱟試劑盒；廈門鱟試劑鱟試驗微生物快速檢測系統ELx808IULALXH；標準要求；內毒素控制
摘要
目的：依據血液透析治療對內毒素的相關標準要求，采用鱟試劑法對透析液的內毒素含量進行檢測，基于戴明循環（PDCA）管理模式加強對透析治療過程管控，以提高透析治療的醫療質量。
方法：使用透析專用鱟試劑（凝膠法）對內毒素進行定性及半定量檢測，動態濁度法鱟試劑檢測內毒素濃度，根據國際標準及行內標準，判斷所測的透析液是否合格。
內毒素與血液凈化
1.1內毒素與鱟試劑法
鱟試劑法是目前測定內毒素的主要方法，該方法檢測內毒素特異性強、靈敏度高且操作方法簡便，美國藥典（USP）和中國藥典（CP）均已收載。檢測方法有凝膠法和光度測定法，光度測定法又包括濁度法和顯色基質法。鱟試劑中的C因子能夠與內毒素反應，激活B因子，活化后的B因子使凝固酶原變成凝固酶，凝固蛋白原在凝固酶的作用下形成凝固蛋白，最終形成凝膠。
1.2內毒素污染來源
與透析有關的內毒素污染來源主要包括以下4個方面。
（1）水前處理系統。透析用水的處理系統包括沉淀過濾器、軟水器、活性碳過濾器等水質前處理系統，以及逆滲透膜系統或去離子器和超過濾器等。
（2）反滲水輸送管道。管徑大小、材質和結構的不同會造成細菌滋生，甚至會形成生物膜附著在管路的表面而有利細菌的滋生，污染復用用水。
（3）透析濃縮液配制的過程環節，透析濃縮液的污染，重碳酸鹽透析液非常容易滋長細菌。
（4）透析機的污染，上下機及兩班連臺之間的消毒控制。
1.3內毒素超標的臨床表現
血液透析設備系統消毒過程中透析用水、透析濃縮液及透析液內毒素超標會將內毒素帶入尿毒癥患者血液，導致尿毒癥患者產生內毒素血癥。內毒素作用于吞噬細胞、中性粒細胞、內皮細胞、血小板、補體系統以及凝血系統，并誘生腫瘤壞死因子a（tumor necrosis factor-x，TNF-a）、白細胞介素-1（interleukin，IL-1）、IL-6和IL-8、組胺以及激肽等生物活性物質，使組織器官毛細血管灌注不足，出現缺氧及酸中毒等。
高濃度的內毒素也可激活補體替代途徑，引發高熱、低血壓以及活化凝血系統，最后導致彌散性血管內凝血。嚴重時可導致微循環衰竭和低血壓為特征的內毒素休克甚至死亡。發現后要檢查原因，感染者應給予抗感染治療。
2.1 檢測樣本及樣品收集
（此處省略部分內容，如有興趣了解，可聯系我司獲取此部分內容。）
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廈門鱟試劑銷售熱線：0592-2085561
也可到我們的官網留言：www.c840.cn
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2.2 儀器與試劑
采用ELx808IULALXH型鱟試驗微生物快速檢測儀（美國Bio-Tek公司授權廈門鱟試劑生物科技有限公司代理出售）；渦旋振蕩儀；恒溫水浴鍋。透析專用鱟試劑檢測試劑盒（0.25EU/ml，Lot No 130725，Lot No 140825）、透析專用鱟試劑檢測試劑盒（0.5EU/ml，Lot No 120916，Lot No140705）、透析專用鱟試劑檢測試劑盒（2EU/ml，Lot No130620，Lot No 140825，Lot No 151201）和動態濁度法鱟試劑盒（Lot No180627B）均來源于廈門鱟試劑生物科技股份有限公司。細菌內毒素工作標準品，無熱原吸頭，細菌內毒素檢查用水，無熱原板條，無熱原接收管。
2.3 透析相關細菌內毒素限值
（此處省略部分內容，如有興趣了解，可聯系我司獲取此部分內容）
2.4 凝膠法檢測內毒素（透析專用鱟試劑）
（1）陰性對照溶液的制備。
（2）陽性對照溶液的制備。
（3）樣本溶液的制備。用無熱原采樣瓶收集適量的透析用水或透析液。按鱟試劑的靈敏度（入）及樣本的內毒素限值（L）計算樣品的最大有效稀釋倍數（maximum allowable dilution，MVD），其計算為公式1：MVD=L/入
（4）樣本陽性對照溶液的制備。
（5）實驗操作。從試劑盒內取出8支鱟試劑，開啟，設置檢查項目及加樣見表1。
（6）結果判斷。將安瓿從恒溫水浴鍋中輕輕取出，緩慢倒轉180°。若安瓿內的內容物呈堅實凝膠，不變形，不從管壁滑脫者為陽性，記錄為（+）；不呈凝膠或雖生成凝膠但不能保持完整并從管壁滑脫者為陰性，記錄為（一）。
（7）當陰性對照管結果均為陰性，陽性對照管和樣品陽性對照管為陽性，實驗有效，否則無效，應重復實驗。
2.5動態濁度法檢測內毒素
（1）程序設置。
（2）標準曲線制備。
（3）標準曲線及樣品檢測。
（4）數據處理。
設定啟動OD（一般設定為0.02），軟件自動給出啟動時間。建立標準曲線為公式2：
y=-ax+b（2）
式中y為啟動時間的對數值，x為內毒素濃度的對數值，a為直線斜率，b為y軸截距。
當陰性對照的反應時間大于標準曲線最低濃度的反應時間，標準曲線的相關系數|r|≥0.980，標準曲線成立。
3結果
3.1透析專用鱟試劑（凝膠法）
檢測2014-2017年采用3種規格透析專用內毒素凝膠法檢測試劑盒檢測結果見表2。（數據有刪減）
檢測數據表明，嚴格執行相關標準及操作規程后，
2014-2017年透析用水及透析液檢測結果均為陰性合格。
3.2動態濁度法檢測
內毒素濃度標準曲線中Y=-0.2593X+2.938